人工授精實驗室是很嚴謹的工作，必須是有據可依，不能單靠直覺和經驗來判斷。成功管理人工授精實驗室，是豬巴巴不斷追求的目標，本文涵蓋了豬人工授精最全步驟以及技術要點。

公豬的調教

公豬應該在8到10個月大的時候接受訓練，大多數公豬可以適應假母臺采精，訓練的關鍵是耐心，根據經驗，豬巴巴總結了公豬調教口訣。

1. 備制一個采精臺，蒙上豬皮誘公來。

2. 表面涂抹荷爾蒙，忽悠公豬爬上臺。

3. 不停呼喊上上上，多種刺激湊效快。

4. 初配公豬不懂事，師傅可將徒弟帶。

5. 師傅公豬先示范，徒弟公豬隔欄看。

6. 耐心訓練三五次，訓練成功即告完。

7. 調教公豬重安全，兩頭公豬勿同欄。

8. 采精處設逃逸口，公豬襲人由此穿。

技術要點：

公豬體型笨重，采精欄一定要鋪采精防滑墊，防止公豬爬假母臺時滑倒受傷。也可以配合使用公豬誘情劑，引誘公豬爬假母臺。采精員區域一般比采精欄低一些，注意不要被公豬踩到手。

采精前實驗室準備

1. 采精準備很重要，有關器械把毒消。

2. 稀釋液配稍提前，靜置一時緩沖要。

3. 稀釋濃度須準確，精液滲壓恰正好。

4. 冬天保溫勿疏忽，冷擊精子活不了。

技術要點：

蒸餾水和稀釋粉的比例大約是1L：1包(50g)，稀釋用的水必須是滅菌后的蒸餾水（純水）。

攪拌時間不少于30分鐘，稀釋液溫度不得超過40℃，攪拌時防止落入雜物。按所需量稀釋使用，防止浪費。

稀釋后放入水浴鍋或加熱水槽加溫，注意要防止水浴鍋里水進入稀釋液內，水浴鍋的溫度保持在35℃~38℃。

建議使用不銹鋼的保溫杯，不易摔壞，用橡皮圈將采精過濾紙扎在采精杯口。

采精前的保溫杯必須保證38℃恒溫加熱，稀釋時使用的容器同樣需要38℃恒溫加熱。

開始給公豬采精

1. 公豬進得采精室，擠壓包皮排積尿。

2. 待豬爬上采精臺，緊握陰莖莫放掉。

3. 借助陰莖前挺力，順勢前伸莖固牢。

4. 陰莖根部顯露時，射精即要開始了。

5. 集精杯口過濾布，囊液凝塊過濾掉。

6. 始出精液不可接，色清精少且混尿。

7. 正常精液乳白色，此態精子密度高。

8. 公豬射精兩三次，兩百毫升不為少。

技術要點：

目前常見的采精方式有兩種，一種是普通采精法，也就是手動采精，另一種則是先進的自動采精，不管是哪種采精方法，都要注意以下技術要點。

采精前要用手將公豬尿液排凈（包皮積尿），剛開始射精時的膠狀物也要排凈。

使用的過濾紙一定不能有殺精成分，不可使用橡膠手套（橡膠有殺精成分）。

采精室溫度最好在25℃以上，采精杯要加熱到38℃左右，可以減少死精。

射精完全結束后才能松手，未排空的精液會影響下次采精的精液質量。（一般公豬的采精量在200ml，也有少數在500ml的）

射精包括四個階段：初期精液期、富含精子期、后期精液期、凝膠部分。

初期和后期的精液不要采集，這兩個階段主要成分為血漿，外觀呈透明到半透明狀；富含精子期的成份外觀為白色或米白色，是應該采集的精液；凝膠部分自始自終存在于整個射精過程。通過采精杯上的過濾紙可以將精液與凝膠分離。

第一階段與第二節段變化明顯，而第二與第三階段是逐漸變化的，當射出的精液變成較白的米白色，就可以開始收集了。相反的，當精液開始出現水樣時，停止收集將采精杯拿走。但一定要讓公豬完成整個射精過程。

公豬精液檢測評估和稀釋

一次完整的采精射精量在200~500ml，精子密度大約2~3億/ml，精子顏色乳白色或淺灰色，呈云霧狀，略帶腥味，PH值大約在7.0~7.8之間。

如何評估精子的質量？

豬的精子分頭部、頸部和尾部三個主要部分，長度為50～60μm。

采精結束后，原精液應再次過濾雜質，經過天平稱重，檢測精液的PH值，然后可以通過精子密度儀來檢測精子密度，最后通過顯微鏡觀察來看精子活力和畸形率。

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  電子顯微鏡

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  精子活力圖

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  第一次稀釋

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  第二次稀釋

精子形態評估
A.正常精子的形態	1-3
B.異常精子的形態	4.窄頭 5.頭基部狹窄 6.梨形頭 7.圓形頭 8.巨頭 9.小頭 10.發育不全 11.偏軸
C.中段的形態	11.正常的中段 12.螺旋狀中段 13.中段鞘膜脫落 14.假原生質滴 15.雙中段
D.尾部的形態	16.近端原生質滴 17.遠端原生質滴 18.單卷尾 19.尾多重卷曲 20.環形卷曲 21.無尾的頭

技術要點

1. 稀釋用的器皿使用前須消毒，用少量稀釋液沖洗一遍；

2. 品質檢查不合格(活率＜0.7)的精液不能稀釋；

3. 精液采集后盡快稀釋，原精貯存時間不宜超過30分鐘；

4. 稀釋時嚴禁太陽光直射精液，應于較暗處操作；

5. 精液要求等溫稀釋，以精液為標準，調節稀釋液溫度；

6. 稀釋順序是稀釋液沿杯壁加入到精液中，沿一個方向攪拌混勻；

7. 高倍稀釋時先進行低倍稀釋，以防 “稀釋打擊”；

8. 根據精液的品質、輸精量和配種母豬頭數來確定稀釋液總量；

9. 以每個輸精劑量30億/80~100ml來確定稀釋倍數；

10. 稀釋后要求靜置片刻再做精子活率檢查；

精液稀釋計算公式

制造精液瓶數公式：原精量*密度*活率*(1–畸形率)/容器規格=制造瓶數

制造稀釋液使用量公式：制造瓶數*瓶裝重量-原精量=所需稀釋液量

例如：采精量:250ml，密度:300*106ml，活率:90%，畸形率:10%，瓶裝精子含量（80ml/30億），計算所需稀釋液量和制造瓶數。

稀釋方法
區分	采精量（稀釋后精液量）	所需稀釋液量	稀釋溫度變化
第一次稀釋	250ml（采精量）	250ml	35℃~37℃
第二次稀釋	500ml	500ml	33℃~35℃
第三次稀釋	1000ml	848ml	31℃~33℃
第四次稀釋	1848ml	0	29℃~31℃
稀釋完成	1848ml	0	25℃左右（實驗室室溫）

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  反離子滲透純水機

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  純水機結構圖

精液灌裝存儲與運輸

精液的灌裝

稀釋后精液的常見保存方法有三種：輸精瓶、輸精管和連續輸精袋。其中最常用的是輸精瓶，使用輸精瓶分裝的精液容易導致精子沉淀擠壓而死，而扁平的精液管和連續輸精袋可以更好的保存精液，其中連續輸精袋是全自動精液灌裝機必備的。

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  第一代：輸精瓶

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  第二代：精液管

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  第三代：連續精液袋

上面講到的精液保存方式對應著三種常見的精液灌裝方法，最原始的是手動灌裝，其次是半自動精液灌裝機，最先進的是全自動精液灌裝機。

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  手動灌裝機

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  半自動灌裝機

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  全自動精液灌裝機

精液灌裝與存儲對比
灌裝形式分類	第一代	第二代	第三代
灌裝設備要求	手動灌裝，無需設備	自動灌裝+手動封口	全自動灌裝+封口
自動化程度	操作麻煩，產量低	操作簡易，全自動設備可生產1000劑/小時	操作簡易，全自動設備可生產1800劑/小時
對精子的影響	精子細胞容易堆積，宜側放，需要頻繁轉動	精子細胞堆積較少，也需要經常轉動	精子細胞堆積很少，無需經常翻動
運輸情況	不適合運輸	適合運輸	適合運輸
適合的用戶	小型豬場	大型豬場或公豬站	大型豬場、公豬站和人工授精中心

一般來說，儲存的精液袋每天翻轉一次，精液瓶每天翻轉兩次，慢慢轉動精液瓶幾圈，晃動稀釋劑里沉淀的精液細胞。

實驗室里主要使用恒溫冰箱來儲存精液，運輸主要使用車載恒溫冰箱或車載固定兩用恒溫冰箱。

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  車載固定兩用

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  實驗室用恒溫冰箱

精液保存要求

精液需緩慢降溫，室溫存放1~2h，實驗室溫度太低可使用紗布包裹。注意冰箱內溫度的變化防止溫度升高或降低，減少保存箱開關次數，以減少對精子的影響。

每12h將精液搖勻1次，要輕緩均勻，使用前檢查活率，活率小于60%的精液應棄之，用稀釋液保存的精液，應盡快用完.

人工授精實驗室設備的清洗

1、一般清洗

工作結束后，關閉設備電源。用保鮮膜封口剩余的稀釋液，放入冰箱保存。用濕毛巾將操作臺擦干凈。清洗燒杯和玻璃棒，使用專用的清洗劑清洗干凈器材，再用蒸餾水清洗兩次，最后開口倒置放在毛巾上。

清洗溫度計，跟玻璃制品一樣沖洗，最后用干燥毛巾擦干。檢查所有器材（包括瓶子、蓋子等等）。補充第二天實驗所需的器材。用酒精擦拭消毒操作臺。

2、設備滅菌

如果條件允許，所有的燒杯和玻璃棒都應進行消毒。將清洗過的設備放入滅菌器的架子里。確定滅菌容器內有一定的蒸餾水。打開滅菌設備達到設定溫度，滅菌時間20min即可。

將燒杯和玻璃器皿從滅菌器內取出，完全干燥后，放入儲存柜里。每兩周清理一次滅菌器，并更換容器內的蒸餾水。

人工授精（輸精）

發情的檢查

判斷母豬發情的方法多種多樣，無論是哪種方法，都需要配種員有豐富的經驗，一般來說母豬的發情周期在21天左右，仔豬斷奶后3-7天發情。

母豬的發情周期可分為發情前期、發情期、發情后期，母豬只有在發情期才會出現靜力反應，出現這種行為的母豬可以進行輸精了。

現在豬場常見的查情方法是使用公豬檢查，看看陰道是否紅漲有粘液，用手按壓母豬，看母豬是否有靜立反應。

發情檢查表
	發情前期	發情期			發情后期
靜立反應	按壓無靜立反應	按壓背部有靜立反應			無靜立反應
觀察陰道	陰道紅腫	陰道粉色，紅腫消退			灰白色無腫脹
觀察粘液	粘稠或無粘液	粘液多，呈水樣			粘液消失
行為舉止	焦躁，食欲減退	愿意接受爬跨			恢復正常
持續時間	1-3天	一階段：公豬反應 8-12小時	允許飼養員爬跨 24-36小時	二階段：公豬反應 8-12小時	直到下次發情
是否能人工授精	否	否	是	否	否

人工受精的方法

人工受精主要有三種方法：子宮頸輸精法、子宮內輸精法和子宮角輸精法，目前最常用的是子宮頸輸精法。

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將輸精管瓶插入陰道，斜上45°對準子宮頸。待插進30厘米左右，感到有阻力插不進時稍許向外退一點，便可緩慢地注入精液。 輸精動作要點：輕插、適深、慢注、輕拔。